एक प्रोटीन को कैसे क्रमबद्ध करें
हो सकता है कि आप एक विज्ञान परियोजना के लिए प्रोटीन को अस्वीकार करना चाहते हैं, या हो सकता है कि आप denatured भोजन के बारे में पढ़ लें और जानना चाहते हैं कि यह कैसे काम करता है. Denaturation वह प्रक्रिया है जिसके द्वारा प्रोटीन गर्मी, विकिरण, एसिड, और सॉल्वैंट्स सहित बाहरी ताकतों के कार्यों के कारण अपने आकार और संरचना को खो देता है. कार्बनिक सॉल्वैंट्स आमतौर पर प्रोटीन को दर्शाता है. एक प्रोटीन को अस्वीकार करने का सही तरीका उस विशेष व्यक्ति पर निर्भर करता है जिसके साथ आप काम करना चाहते हैं, क्योंकि उन्हें सभी को विभिन्न स्तरों पर विभिन्न denaturing एजेंटों की आवश्यकता होती है. अधिकांश प्रोटीन को विनाशित किया जा सकता है, हालांकि, यदि आप जानते हैं कि प्रोटीन के पर्यावरण में क्या बदलना है.
कदम
2 का विधि 1:
एक प्रोटीन को दर्शाता है1. गर्मी का प्रयोग करें. गर्मी एक प्रोटीन को अस्वीकार करने के सबसे आसान तरीकों और सबसे आम तरीकों में से एक है. जब भोजन में प्रोटीन भोजन में मौजूद होता है, तो बस खाना खाना बनाना प्रोटीन को अस्वीकार कर देगा. 100 डिग्री सेल्सियस (212 डिग्री फारेनहाइट (212 डिग्री फारेनहाइट) के तापमान पर उन्हें उजागर करके कई प्रोटीन को विनाशित किया जा सकता है. यह प्रोटीन को अपनी घुलनशीलता को कम करने और कम करने की अनुमति देता है.
- एक्सपोजर की लंबाई इस बात पर निर्भर करती है कि आप गर्मी के लिए क्या उजागर कर रहे हैं. एक अंडा, उदाहरण के लिए, पांच मिनट में मध्यम गर्मी पर एक पैन में पक सकता है, जबकि एक ओवन में पकने में घंटों लग सकते हैं.

2. शराब लागू करें. शराब एक पेप्टाइड बॉन्ड के अमाइड समूहों के बीच होने वाले हाइड्रोजन बॉन्ड को बाधित करता है. जब एक प्रोटीन शराब समाधान के संपर्क में आता है, तो शराब के अणु प्रोटीन श्रृंखला के साथ नए बंधन बनाते हैं. बैक्टीरिया की सेल दीवार के माध्यम से तोड़ने और प्रोटीन को अस्वीकार करने के लिए 70% शराब के समाधान का उपयोग करें.

3. पीएच बदलें. प्रोटीन की आंतरिक संरचना को तोड़ दिया जा सकता है जब इसका पर्यावरण बहुत अम्लीय या बहुत क्षारीय होता है, क्योंकि वे आयनिक बंधन को बाधित करते हैं जो प्रोटीन के नमक पुलों को एक साथ रखते हैं. प्रोटीन के लिए एक एसिड या बेस समाधान जोड़ें. आसपास के वातावरण को denaturation को प्रोत्साहित करने के लिए 10 या नीचे 4 के पीएच पर होना चाहिए. यदि आप एसिड के साथ परिवर्तन को प्रेरित कर रहे हैं, तो पीएच 2 और 5 के बीच होना चाहिए.

4. भारी धातु लवण आज़माएं. भारी धातुएं प्रोटीन में बांड को बाधित कर सकती हैं, जिससे इसकी संरचना खो सकती है. बुध और नेतृत्व जैसे भारी धातुओं के लवण का उपयोग विभिन्न प्रोटीन को अस्वीकार करने के लिए किया जा सकता है. इस तरह के लवण अधिकांश रासायनिक आपूर्तिकर्ताओं से उपलब्ध हैं, और हमेशा दस्ताने और आंखों की सुरक्षा सहित सावधानी और उचित सुरक्षा उपकरण के साथ उपयोग किया जाना चाहिए.
2 का विधि 2:
प्रोटीन का पुनर्निर्माण1. निर्धारित करें कि एक प्रोटीन फिर से भर सकता है. Denaturation के कुछ रूप स्थायी हैं, जबकि अन्य पूर्ववत किया जा सकता है. एक अंडे या मांस को पकाना, उदाहरण के लिए, पूर्ववत नहीं किया जा सकता है, लेकिन एक प्रोटीन जिसे उच्च पीएच के संपर्क में लाया गया है, एक अधिक तटस्थ वातावरण में डालने पर आकार हासिल कर सकता है.
- प्रोटीन रेफोल्ड कर सकता है या नहीं, इसके डीएनए पर निर्भर करेगा. डीएनए प्रोटीन के लिए अपनी मूल स्थिति में लौटने के लिए आवश्यक जानकारी रखेगा.

2. Denaturing कारक को हटा दें. प्रोटीन के चारों ओर पर्यावरण को स्टेसिस में लौटाएं और denaturing तत्व को हटा दें. उदाहरण के लिए, एसिड या आधार को हटा दें, या प्रोटीन को एक और उचित तापमान पर वापस लाएं.

3. पुनरावृत्ति किट का उपयोग करें. कई प्रयोगशाला आपूर्ति कंपनियां पुनर्निर्माण किट बेचती हैं जो आपको पुनर्मूल्यांकन को प्रोत्साहित करने के लिए सर्वोत्तम पैरामीटर के लिए स्क्रीन करने की अनुमति देती हैं. यदि आप प्रयोगशाला या प्रयोगात्मक सेटिंग में प्रोटीन को देख रहे हैं तो ऐसी किट विशेष रूप से सहायक हो सकती हैं.
टिप्स
एक denatured प्रोटीन अपनी quarternary, तृतीयक, और माध्यमिक संरचना खो देता है जो अपने मूल राज्य में स्पष्ट है, लेकिन इसकी प्राथमिक संरचना बनी रहेगी.
एक विकृत प्रोटीन कुछ मामलों में, एंजाइमों के साथ, एंजाइमों के साथ, अपनी क्षमता को खोने के लिए अपनी कुछ जैव क्षमता भी खो देता है. उदाहरण के लिए, सब्सट्रेट अब एंजाइमों को बंधन करने में सक्षम नहीं हो सकते हैं जिन्हें अस्वीकृत किया गया है.
Denatured प्रोटीन एक समाधान में अपनी घुलनशीलता खो सकता है.
आप स्ट्रैंड्स को अलग करने के लिए प्रयोगशाला तकनीकों का उपयोग करके न्यूक्लिक एसिड को भी बदनाम कर सकते हैं.
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